塑料粘附8实验检测骨髓原始，细胞陈君敏魏陈志哲2髓，肝素抗凝，用淋巴细胞分离液分离单个核细胞，取少量细胞加入甲基纤维素培养基，37.0，5，2孵箱培养，14天后计数集落0，河，其余细胞作艮结果4份骨髓的边相对数7细胞分别为662，534，2220和20细胞分别为14.16.3，33.6和25.6，者大致平行。结论於可作为骨髓原始祖细胞的边=集落数+加入半固体培养基的细胞膣非贴壁细胞总数+初始1318总数评估方法，由于方法简便，耗时短，适合实际应用。

　　原始造血祖细胞的定量和功能分析对于造血，细胞移植及其基因治疗1.常重要。原始细胞的检测般用长期培养启动细胞实验2，由于该实验繁琐耗时，实际应用有定困难采用塑料粘附8实验於估计骨髓原始祖细胞含量，所用材料少，方法简便，耗时短巧笔者于1998年8月1998年12月进行实验研究，报告如下1材料与方法1.1标本来源为4例非血液系统疾病患者骨髓，用5001的肝素抗凝，骨髓涂片常规检查正常1.2，实验3肝素抗凝的骨髓用淋巴细胞分离液上海试剂厂梯度密度离心，分离单个核细胞15，仍洗涤2次，用合1酚胎牛血清述，柬，〉加入25削2的叫料培养瓶，1.哗，37，3032孵箱培养。2后去除非贴壁细胞，加入含钙镁的33室温洗去非贴壁细胞，重复3次，柙1附的细胞加含1广呢1氢化可的松的2况，125马血，及12.5715的1培养7天后吸取非贴壁细胞，离心。用含205的10肘培养基洗2次并重新悬浮，计数，调整细胞浓度至约25取适量加入半固体培养坫下述1.14天1计数1；1集落按下式计兑PA血液科，福州350005 1.3.遍检测新，分尚的8刖抑，或上述，实验培养7天的非贴壁细胞用2705的0厘培养基悬浮，计数并调整细胞浓度约250，0.2，加入半固体培养基2，允分棍勾，分成2份，分别加入351的培养，3尤，激，孵箱培养14天后，倒置显微镜下计集落数，取2个集落数的均值。半固体培养基为0.甲基纤维素华美生物工程公司溶液，含3003，1牛血清白蛋白83，华美生物工程公司，14molLMKSigma，2nimolLpfil0fe种细胞因子均为1公司惠赠。

　　1.4⑶型分析1述於实验培养7天的粘刚8，用。2双肫酶枸橼酸钠溶液51消化，37，孵育约3，贴壁层浮起时加，中和胰酶，反复吹打使所有细胞脱落，离心，用，83洗涤并重新悬浮。重悬浮的细胞悬液或新鲜分离的；1的，旧通夜加，标记的鼠抗人，4 30.离心，以先；条，1；=把流式细胞仪，1美伯乐公司检测1；1软件分析= 2结果附附4份1站标本诰血祖细胞检测结，士。

　　3讨论对人造血祖细胞的定量分析可采用半固体培养基的集落形成实验，但该实验只说明较成熟的定向扒细胞如况4；这些机细胞不具浴长期植活能力。原始祖细胞具有长期植活能力，血干细胞移植物中的原始祖细胞含试关系到移植的成畋调此原始祖细胞的定量检测有重要价值检测原始祖细胞般采用，匝檑2，整个过程需10锾不仅如此，由于所用材料多，实验繁琐，实验过程被污染料粘附的造血祖细胞对，脲嘧啶抵抗达们1 1和04+是21天血岛形成细胞从1的前体细胞，能维持在长期骨髓培养丁系统的造血5，因此是原始的造血祖细胞通过塑料粘附3实验，即检测朔料粘附的冰1〉体外产生314冰数，可，兑骨髓原始机细胞的相对数量！笔者的4份标木於为544时与较成熟的定向祖细胞014；1人致平行不同标木之间较大差异，能由于文验本身造成。因为起始细胞数和培养7人口的非贴壁细胞数的误均影响*后结果不过根据的经验洞份骨髓标本分开实验的重复性好，结果无显著不同。与笛楸冉希，妒笛椴唤龊氖倍台整个过程3周，较叮；1检测多。1周，而且所目材料少，方法简匣打染机会少训此较适合实际应甩据文献报道真料粘附的⑶细胞占竹髓所有，4+细胞的览1脱。笔者结果显，塑料粘附的1中04+细胞占15.和18.脱，显著高于8，8中的0.秘和秘，说明塑料粘附有富集骨髓⑶+细胞的作用洞时提塑料粘附的14+细胞数也是评，骨髓原始机细胞的项指标，有待进步考察。